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CAS RN: 9003-99-0 | 产品编码: L1143282

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辣根过氧化物酶,RZ:>3.0,活性:>250 IU/mg

RZ:>3.0,活性:>250 IU/mg 过氧化物酶;乳过氧化物酶 NULL 相对分子质量约 40000 EC 1.1 文档:
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D16115-100mg 辣根过氧化物酶 RZ:>3.0,活性:>250 IU/mg 100mg 486.00 486.00

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一、基本结构和组成

1. 分子结构:HRP由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成,是一类含有血红素的糖蛋白。其分子量约为44kDa,等电点为pH 7.2。

2. 辅基:HRP的辅基为铁卟啉(即血红素),这种结构使得HRP具有独特的催化特性。

3. 同工酶:HRP由多个同工酶组成,这些同工酶在结构和功能上略有不同,但都具有相似的催化活性。

二、催化机制

1. 反应类型:HRP主要催化氧化还原反应,其反应式可表示为Donor + H₂O₂ → Oxidized Donor + 2H₂O。在这个过程中,HRP利用过氧化氢(H₂O₂)作为电子受体,将供体(如酚类、胺类化合物)氧化,同时自身被还原。

2. 中间产物:HRP的催化过程涉及多个中间产物的形成。首先,HRP与过氧化氢反应形成复合物Ⅰ(绿色有活性的酶-底物复合物),然后复合物Ⅰ进一步与供体反应生成复合物Ⅱ(红色有活性的复合物),最后复合物Ⅱ被还原并释放出氧化后的供体和游离的HRP。

三、理化性质

1. 溶解性:HRP易溶于水和58%以下饱和度的硫酸铵溶液,但在0.62饱和度以上的硫酸铵溶液中不溶。

2. 稳定性:HRP在室温下相对稳定,但在加热到63℃后15分钟内仍能保持稳定。其冻干粉及2.8mol/L硫酸铵悬浮液在4℃下可稳定存在一年。

3. 光谱特性:HRP的辅基和酶蛋白分别在403nm和275nm处有最大吸收光谱。一般以OD₄₀₃nm / OD₂₇₅nm的比值RZ来表示酶的纯度,高纯度的酶RZ值应在3.0左右。

四、活性和影响因素

1. 活性测定:HRP的活性可以通过多种方法进行测定,如RZ值法、愈创木酚法等。其中,RZ值法是通过测定403nm和275nm处的吸光度比值来评估酶的纯度;愈创木酚法则是通过测定HRP催化愈创木酚氧化生成有色产物的速度来评估酶的活性。

2. 影响因素:HRP的活性受到多种因素的影响,包括温度、pH值、离子浓度等。最适pH值因供氢体不同而稍有差异,但多在pH 5左右。此外,HRP还对某些金属离子(如Ca²⁺、Mn²⁺)敏感,这些离子可能会影响其活性。

五、应用领域

1. 免疫学检测:由于HRP标记技术具有灵敏度高、特异性强等优点,它广泛应用于免疫学检测领域。通过将HRP与特定抗原或抗体结合,可以制备出高灵敏度的免疫试剂盒用于检测各种生物分子。

2. 环境监测:HRP可用于构建生物传感器来监测环境中的有害物质。例如,利用HRP对特定底物的高度选择性和灵敏性,可以构建出能够检测重金属离子、有机污染物等的生物传感器。

3. 医学诊断:HRP在医学诊断领域也有广泛应用。它可以用于检测尿液中的蛋白质、葡萄糖等成分以及血液中的胆固醇、甘油三酯等指标。此外,HRP还可以作为药物代谢研究和药物筛选的

基本参数

1. 分子量:约为44 kDa(千道尔顿)。

2. 活性:通常以单位每毫克(U/mg)表示。高纯度的HRP活性一般大于250 U/mg。

3. RZ值(Reinheitszahl):表示酶的纯度,是A403与A280的比值,一般在2.5-4.0之间。

物理性状

1. 外观:通常为褐色结晶性冻干粉状物。

2. 溶解性:在5%水溶液中应完全溶解。

环境条件的影响

1. pH值:最适pH值通常在7.0左右,不同的缓冲液种类和离子浓度会影响酶的活性。

2. 温度:最适温度为25℃,温度变化会影响酶的活性和稳定性。

储存和运输

1. 储存条件:建议在低温(2-8°C)下保存,并避免反复冻融。长期储存最好放置在-20℃避光环境中。

2. 有效期:通常为一年或以上,具体取决于储存条件和生产批次。

安全性和法规

1. 安全数据:辣根过氧化物酶通常被认为是安全的,但操作时仍需注意防护措施。

2. 法规信息:遵循当地有关化学品和生物制品的法律法规,确保合法合规使用。

以下是关于辣根过氧化物酶的安全信息,从GHS分类、安全术语、风险术语、安全措施、急救措施、消防措施、泄漏应急处理、废弃处置等角度进行的详细分析:

1. GHS 分类

- GHS危险性类别:辣根过氧化物酶通常不被视为有害化学品,因此未列入GHS(全球化学品统一分类和标签制度)的危险类别。

- GHS标签要素:无需特殊标签。

2. 安全术语

- S1/2:保持封闭,在通风良好的地方使用。

- S26:不慎与眼睛接触后,请立即用大量清水冲洗并征求医生意见。

- S36/37:穿戴适当的防护服和手套。

3. 风险术语

- R36:刺激眼睛。

- R42/43:吸入和皮肤接触可能引起过敏。

4. 安全措施

- 个人防护装备:在使用辣根过氧化物酶时,建议佩戴防护眼镜、实验室大衣和一次性手套,以防止皮肤和眼睛接触。

- 工程控制:应在通风良好的实验室环境中操作,避免吸入酶的粉尘或气溶胶。

- 卫生措施:工作结束后彻底洗手,避免将酶带到口、鼻、眼等部位。

5. 急救措施

- 皮肤接触:脱去被污染的衣物,用大量清水冲洗受影响的部位。

- 眼睛接触:提起眼睑,用流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟,并尽快就医。

- 吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处,保持呼吸道通畅。如呼吸困难,给输氧;如呼吸停止,立即进行人工呼吸并就医。

- 食入:误服者用水漱口,喝足够的水以稀释胃内容物,但不要催吐,立即就医。

6. 消防措施

- 灭火方法:辣根过氧化物酶本身不易燃,但周围环境发生火灾时,可以使用水、泡沫、干粉、二氧化碳等常规灭火剂进行扑救。

- 特殊风险:正常条件下辣根过氧化物酶不会燃烧,但应远离火源和热源。

7. 泄漏应急处理

- 小量泄漏:用干净的铲子收集干燥的酶粉末,放入密闭容器中,并按实验室废物处理规程处置。

- 大量泄漏:疏散泄漏区域人员,防止踩踏和滑倒,并用适当的吸附材料清理泄漏物,防止扩散。

8. 废弃处置

- 废弃方法:根据实验室废物管理规程,将用过的辣根过氧化物酶溶液或固体废弃物集中收集,交由专业废物处理公司进行处理。不得随意倾倒于环境中。

9. 安全数据表

- 编制依据:根据相关法规和标准,制定辣根过氧化物酶的安全技术说明书(MSDS),提供详细的物质信息和使用指南。

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