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1. 基本结构
- 分子量: 链霉亲和素的分子量约为60 kDa。
- 亚基结构: 该蛋白由四个相同的亚基组成,每个亚基都能独立结合一个生物素分子。
2. 生物素结合能力
- 高亲和力: 链霉亲和素与生物素的结合常数(Kd)为10^-14 M,这意味着它们之间的结合非常紧密且稳定。
- 特异性: 链霉亲和素对生物素具有高度特异性,几乎不与其他分子发生非特异性结合。
3. 热稳定性
- 耐热性: 链霉亲和素具有较高的热稳定性,能够在高温下保持活性。例如,它可以在60°C的条件下保持稳定,并在95°C时仍保持部分活性。
4. 酸碱稳定性
- pH稳定性: 链霉亲和素在较宽的pH范围内(如pH 2-12)都保持稳定,这使得它在多种实验条件下都非常有用。
5. 溶解性
- 水溶性: 链霉亲和素具有良好的水溶性,可以在水溶液中均匀分布。
6. 光谱特性
- 紫外吸收: 链霉亲和素在280 nm处有最大紫外吸收峰,这可以用于蛋白质定量分析。
7. 电泳特性
- 等电点: 链霉亲和素的等电点(pI)约为5.5,这意味着在pH 5.5时,蛋白质分子不带电荷。
8. 免疫原性
- 低免疫原性: 链霉亲和素在许多动物模型中的免疫原性较低,这使得它在体内应用中较为安全。
9. 化学修饰
- 可修饰性: 链霉亲和素可以进行各种化学修饰,如荧光标记、酶标记等,从而扩展了其应用范围。
10. 反应条件
- 储存条件: 链霉亲和素通常以冻干粉的形式保存,在低温(如-20°C)下可以长期稳定保存。
应用领域
- 生物传感器: 利用其对生物素的高亲和力,可以构建高灵敏度的生物传感器。
- 免疫检测: 在ELISA等免疫检测方法中,链霉亲和素被广泛用于信号放大。
- 药物递送: 通过生物素-链霉亲和素系统,可以实现靶向药物递送。
- 分子成像: 链霉亲和素可以与荧光染料或放射性同位素结合,用于体内分子
1. GHS分类
- 有害物品:链霉亲合素被归类为有害物品,因为它对眼睛、呼吸系统和皮肤有刺激性。
2. 安全术语
- S24/25:避免与皮肤和眼睛接触。
- S36:穿戴适当的防护服。
- S26:不慎与眼睛接触后,请立即用大量清水冲洗并征求医生意见。
- S36/37:穿戴适当的防护服和手套。
3. 风险术语
- R22:吞食有害。
- R36/37/38:刺激眼睛、呼吸系统和皮肤。
- R21/22:皮肤接触及吞食有害。
4. 急救措施
- 吸入:如果吸入,请将患者转移到空气新鲜处,如有呼吸困难,输氧。
- 皮肤接触:用大量清水冲洗至少15分钟,如有必要,咨询医生。
- 眼睛接触:立即用大量清水冲洗至少15分钟,并咨询医生。
- 吞食:不要催吐,饮足量温水以稀释,如有不适,就医。
5. 消防措施
- 灭火方法:不适用,因为链霉亲合素本身不是易燃物。
- 危险特性:不适用,没有相关的危险特性。
6. 泄漏应急处理
- 个人防护:穿戴适当的防护服和手套。
- 环境清理:使用合适的材料吸附或清理泄漏物,防止扩散。
7. 废弃处置
- 处置方法:按照当地法规进行处置,通常作为有害废物处理。
- 注意事项:不得随意倾倒,需交由专业废物处理公司处理。
8. 安全数据表
- 化学品名称:链霉亲合素(Streptavidin)。
- CAS号:9013-20-1。
- 分子式:C14H17BrClNO2S。
- 分子量:378.71228。
- 储存条件:在-20°C下保存。
1. 纯度
- 电泳纯度:通过SDS-PAGE电泳检测,链霉亲和素应呈现单一条带,表明其高度纯化。任何杂质或降解产物都会影响其在实验中的特异性和可靠性。
- HPLC纯度:使用高效液相色谱(HPLC)进一步验证其纯度,确保无其他蛋白质或多肽污染。高HPLC纯度意味着样品在生产过程中的质量控制严格。
2. 活性
- 结合能力:链霉亲和素的主要功能是与生物素特异性结合。通过比色法或荧光法测定其与生物素的结合常数,可以评估其活性水平。高活性的链霉亲和素将具有更强的信号放大能力和更高的灵敏度。
- 活性单位:通常以每毫克蛋白能够结合多少微克生物素来表示,这是衡量其功能性的重要指标。高活性单位意味着更高效的生物标记和检测能力。
3. 稳定性
- 热稳定性:链霉亲和素在高温下仍能保持结构和功能的稳定性,这使得它可以在多种实验条件下使用而不失活。
- 化学稳定性:对pH变化、有机溶剂和其他变性剂具有较强的抵抗力,这保证了在各种复杂实验环境中都能维持其性能。
4. 特异性
- 非特异性结合低:与同类型的亲和素相比,链霉亲和素的非特异性结合更低,这对于需要高信噪比的实验尤为重要。
- 生物素特异性强:链霉亲和素只与生物素及其衍生物发生特异性反应,这种专一性是其在生物标记和检测中广泛应用的基础。
5. 安全性
- 内毒素水平:对于用于体内实验或临床诊断的链霉亲和素,必须严格控制内毒素水平,以防止引起免疫反应或其他副作用。
- 无菌处理:确保产品在生产过程中遵循GMP标准,避免微生物污染,这对于保证实验结果的准确性和重复性至关重要。
6. 物理性质
- 等电点:链霉亲和素的等电点通常在pH 6.0左右,这有助于其在特定缓冲体系中保持稳定性和溶解性。
- 分子量:明确其单体和四聚体的分子量,有助于计算摩尔浓度和设计实验方案。
7. 储存条件
- 推荐温度:链霉亲和素应在-20°C下长期储存,避免反复冻融,以保持其稳定性和活性。
- 缓冲体系:建议在中性pH的缓冲液中保存,例如PBS或Tris-HCl缓冲液,以减少蛋白质降解和聚集的风险。
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