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西亚试剂:首次实时观察到DNA复制过程中聚合酶的运动

据一篇发表于与10月27日PLoS Biology杂志的研究报告,美国俄亥俄州立大学研究人员首次将荧光标记物(fluorescent marker)插入聚合酶Dpo4(DNA polymerase IV)的四个结构域和DNA其中一条链中,并利用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer technology)首次实时(real-time)观察到聚合酶结合到DNA链上正确的核苷酸位置并完成DNA复制的过程。

在该研究中,根据聚合酶Dpo4的各个结构域所标记的荧光标记物显示,Dpo4的四个结构域(palm,thumb,finger and little finger)中有三个可紧紧地抓住DNA链,使dNTPs依次与单链DNA互补配对完成DNA的复制,而与前三个结构域相反方向的little finger结构域,研究人员认为可能在DNA复制过程中,为错误的DNA互补配对留出一定的空间。

研究人员在该研究报告中,还将聚合酶结合到DNA链上到复制出一条完整的DNA链的过程明确地分为8个阶段