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西亚试剂::iPSC无饲养层培养基

2011年,威斯康辛大学麦迪逊分校Morgridge研究所的Chen等在Nature Methods上发表文献称,在mTeSR1培养体系中去除了β-巯基乙醇后,BSA的存在变得没有必要。他们进一步测试了培养基中其它成分的作用,最后得到了一种只由8种成分组成的hESC/iPSC培养基,并将之命名为E8(Chen et al., 2011)

E8培养基是一种化学成分完全明确的、所含蛋白均为人重组蛋白的无饲养层(feeder-free)培养基。由E8培养基培养得到的hESC/iPSC,具有优于血清培养体系下的hESC/iPSC的克隆形态、多能性干细胞marker表达以及向各个胚层分化的能力,与mTeSR1培养得到的hESC/iPSC没有明显差别。E8培养基支持hESCiPSCfeeder-free培养,配合人重组vitronectin基质铺皿,可以得到比在Matrigel上培养更紧密、形态更规则的克隆。

据以往研究结果,培养基中含有的各个成分都对细胞具有不止一种作用(多态性),有些作用可能还不为人们所知,而成分之间以及它们产生的下游信号之间的相互作用产生的影响更为错综复杂。因而仅含有8种成分的E8培养基对细胞的未知影响更小,较其它培养基在细胞功能试验上更具优势。

最后,E8培养基所含的8种成分的生产过程都是可控的,因而不同批次的培养基质量一致,经测试不同批次的E8培养基培养的得到的ESC/iPSC都具有相同的最佳多能性特征。并且细胞可以直接从非E8培养体系转入E8培养体系,而不产生适应的迟滞期。

在干细胞研究的临床推进之路上,E8培养基有着得天独厚的优势,这预示着由此产生的培养方法,将成为干细胞培养的主流技术。具体的优势可以总结为:化学成分明确、无动物源成分、支持无饲养层培养;培养得到的hESC/iPSC克隆形态规则、紧密、不易分化,多能性marker高表达,并具有向三胚层分化的能力;简单的组分减少了对细胞自身生化过程的影响、避免了对进行测试的外部因子和药物作用的干扰;不同批次的培养基质量稳定、可重复性高,是目前最为优秀的应用于临床级别hESC/iPSC培养的培养基。

E8培养基需与其相应的试剂组成培养体系,得到最佳的培养效果,例如用人重组vitronectin铺皿、用无酶的温和消化液传代等。商业化的改良E8培养基及其配合的培养试剂在CellapySTEMCELLLife Technology公司有售卖。

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