西亚试剂：：从RNA中提取mRNA的方法(二)

5.mRNA的洗脱

1）为洗脱mRNA，将最终的SA-PMPs重悬于0.1ml的无RNase的水中，温柔地轻弹离心管以重悬颗粒。

2）65℃水浴2分钟。

3）用磁场捕获SA-PMPs，8000rpm离心30秒。

4）将含有洗脱的mRNA的液相移入一无菌的、无RNase的离心管中。勿将颗粒丢弃。

5）重悬SA-PMP颗粒于0.15ml的无RNase的水中，65℃水浴2分钟，用磁场捕获SA-PMPs，8000rpm离心2分钟。将洗脱液与5. 4)步骤中洗脱的mRNA合并。
6）如果这时有任何颗粒也被携带到终溶液中，可用10,000×g，4℃，5-10分钟的离心来去除。小心地将RNA转入一新鲜的无RNase的离心管中。

6.mRNA的浓缩

1）加入等体积异丙醇，混匀。通常立刻有肉眼可见之沉淀生成，立即以12000rpm离心10分钟，沉淀mRNA。或根据沉淀生成的难易，-20℃放置数小时或过夜再沉淀。

2）小心倒去异丙醇，加75%乙醇洗涤。

3）小心倒去75%乙醇，室温干燥。

4）将mRNA溶于20ul无RNase的水中。注意管壁上通常会粘附大量mRNA沉淀，用枪头吸取水滴在管壁上滚动数次以尽可能回收mRNA

丙烯醛肉桂醛桂皮醛4-硝基肉桂醛