西亚试剂：：从噬菌体文库中提取DNA的方法

从cDNA噬菌体文库中提取DNA的方法

1 取5ml噬菌体溶液放入无菌干净的小烧杯中，缓缓加入固体NaCl，使其终浓度为1M （0.292g）,充分溶解后冰浴1小时。

2 4oC下11，000g离心10 min，取上清液于另一个干净烧杯中，将PEG6000加入烧杯中使其终浓度为10％（W/V, 约0.5克），磁力棒缓慢搅拌，冰水浴1.5小时，于4oC，15000rpm离心15min，弃上清。

3 将沉淀溶于300ul TE（pH 8.0），加等体积的酚/氯仿/异戊醇（25：24：1），吸吐混匀。

4 4oC，15000rpm离心15min，取上清液

5 在剩下的酚氯仿异戊醇的溶液中再加入200ul的TE，吸吐混匀

6 4oC，15000rpm离心15min，取上清液

7 将由4和6获得的上清液混合，加等体积的氯仿，吸吐混匀后，4oC， 15000 rpm离心15min

8 加入1/10体积的3M NaAc（pH 5.2）和2.5倍体积的无水乙醇吸吐混匀后至于－80oC30 min以上，于4oC，15000 rpm 离心15min，弃上清。

9 沉淀用70％乙醇洗2－3次，最后一次在4oC，15000 rpm 离心5min。

10 用冰乙醇洗1－2次除去水份。

11 沉淀烘干后加入200 ul TE，测定DNA浓度，－20oC保存备用