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西安交通大学研发出丙肝蛋白芯片检测新技术

      近日,西安交通大学第二医院检验科何谦博士等,在一项陕西省科学技术研究发展计划项目基金课题研究中,成功研发出丙型肝炎病毒(HCV)不同片段抗体蛋白芯片检测新技术。该技术的问世,为丙型肝炎患者的确诊、献血人员的筛选及治疗药物的研发等,提供了先进的检测手段。丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病,丙型肝炎病毒(HCV)慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC)。因此,肝炎病毒的早期检测对治疗和防御疾病的恶化至关重要。 近年来,国内外对HCV的检测技术越来越先进,如PCR技术和基因芯片的应用等。

      目前,美国已采用了RIBA3.0试剂检测技术来检测丙肝病毒,而开发HCV抗体蛋白芯片检测技术,已成为科研人员关注的热点。据研究人员介绍,在HCV检测中,加强和扩大对HCV不同编码区的抗体检测,是近年来该领域研究的一个新热点,它直接关系到检测技术的准确率和应用率。因编码区含混合抗原,由于不同抗原组合时,抗原片段浓度不同,造成抗原配伍不适合或抗原相互干扰,从而影响抗原簇位点的充分暴露,造成漏检现象。本研究表明,蛋白芯片检测与其他肝炎病毒抗体无交叉反应,可降低假阳性发生,试剂稳定性可达1年,在抗体检测、疾病诊断及药物研发中,均显示出快速、高效、高通量信息处理等优势和良好的应用前景。


        蛋白质芯片技术是一种新型蛋白质分析技术,具有集成、并行、快速和自动化分析的优势。它是将蛋白质的分析微缩到小型芯片上,利用荧光或酶显色进行检测,并通过电脑程序分析从而得出准确结果。 在研制过程中,何谦博士等人首先获取HCV融合抗原及分片段抗原,点样于醛基化玻片上,制成HCV不同片段抗体蛋白芯片,通过重复性、稳定性、特异性试验及抗-HCV的ELISA试剂法和目前国际最先进的RIBA试剂法对比,观察评估蛋白芯片的检测率和准确率。  结果发现,对20例阳性标本进行重复和稳定性试验检测,新鲜包被的蛋白芯片与正常对照组结果一致;对20份类风湿因子阳性血清标本进行特异性试验,阴性率达100%。同时还发现,经对99例蛋白芯片的融和抗原检测,其与国内ELISA试剂法相比,阴性符合率为93.8%,阳性符合率为97.1%;蛋白芯片分片段检测与国际RIBA试剂法相比,其阳性符合率为98.5%,阴性符合率为100%。提示蛋白芯片法与ELISA、RIBA试剂法检测结果相比,不仅有良好的一致性(P<0.05),而且优于其他两种检测方法。以上资料由西亚试剂化学品数据库提供