实验室诊断
还需要特别注意的是:对同一样本采用不同生产厂家检测获得的数值之间的差异在一部分上是检测各种叶酸形式的能力和使用的校准品类型造成的。图2表示的是来自美国病理学会能力调查的血清和RBC叶酸结果。图表中表现出的巨大差异极可能是由抗体对不同厂家使用的抗原(谷氨酸)差异所造成的。叶酸检测还没有实现标准化,不过使用通用的参考标准能够降低检测之间的差异。正因如此,谨慎对来自不同实验室和发表研究的叶酸结果进行解释是及其重要的。 1.组氨酸负荷试验在口服组氨酸负荷剂量8h?或24h?后,尿中亚胺甲基谷氨酸排出量增加,但此指标特异性差,应用不普遍。 2.血浆同型半胱氨酸测定当受试者维生素B6和B12营养适宜而叶酸缺乏时同型半胱氨酸水平增高。 药物分析 方法名称:叶酸原料药-叶酸-高效液相色谱法 应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定叶酸原料药中叶酸的含量。 该方法适用于叶酸原料药。 方法原理:供试品经氨溶液溶解后,用水定量稀释,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长280nm处检测叶酸的峰面积,计算出其含量。 试剂:1.?甲醇 2.?磷酸二氢钾 3.?0.5mol/L四丁基氢氧化铵的甲醇溶液 4.1mol/L磷酸溶液 5.?氨试液 6.?0.5%氨溶液 仪器设备:1.?仪器 1.1?高效液相色谱仪 ⒈?2?色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。 1.3?紫外吸收检测器 2.?色谱条件 2.1?流动相:以磷酸盐缓冲液(pH5.0)(取磷酸二氢钾2.0g,加水约650ml溶解,加0.5mol/L四丁基氢氧化铵的甲醇溶液15ml、1mol/L磷酸溶液7ml与甲醇270ml,放冷,用1mol/L磷酸溶液或氨试液调节pH值至5.0,用水稀释至1000ml) 2.2?检测波长:280nm 流速:每分钟1.2ml 2.3?柱温:室温 试样制备:避光操作 1.?对照品溶液的制备 取叶酸对照品约10mg,精密称定,置50mL量瓶中,加0.5%氨溶液约30mL溶解后,用水稀释至刻度,摇匀,即为对照品溶液。 2.?供试品溶液的制备 取供试品约10mg,精密称定,置50mL量瓶中,加0.5%氨溶液约30mL溶解后,用水稀释至刻度,摇匀,即为供试品溶液。 注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 对卒中患者影响 老年人卒中后发生髋部骨折的风险明显高于其他人群,这可能与血浆中高浓度的半胱氨酸有关。Sato将628例65岁以上的老年卒中患者(至少1年前发生卒中致偏瘫后遗症)随机分为2组。治疗组每日给予叶酸5μg和VitBl21500mg,对照组给予安慰剂。结果:2组中跌倒人数之间未见显著差异,而发生髋部骨折的,治疗组中有6例,对照组中有27例,差异非常显著。
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